储存条件： -20℃保存，一年有效

产品介绍：

酵母菌落快速转化试剂盒是以未经冻存的平板菌落（无需摇菌）或者菌液作为菌体来源（短期4℃保存的平板或者菌液亦可使用），无需制备感受态细胞，无需分步热激，一步转化，整个操作流程在90min 内完成。省去了通过两次培养获得状态良好的菌体的过程，以及制备感受态的过程，节省了1-2天的菌种培养转化时间，或者购买感受态的经费。其转化率可达经典酵母转化方法（SK2400）的50%-80%(常规酵母杂交菌种检测)。转化效率可满足除文库传化之外的其它转化实验。

菌落转化步骤：

1.在无菌的1.5 mL的离心管中加入100 μL 的P1溶液（转化液）。

2.在上述转化液中加入1 μg的质粒DNA。共转加入每种质粒各1 μg。

3.挑取2-3个较大酵母菌落加入上述转化液中，震荡混匀。

4.置于42℃ 水浴 60 min （每个20 min 颠倒混匀一次，避免酵母菌沉底）。

5.可选步骤：3,000 转离心3 min，弃上清。用400 μL YPD Plus Liquid Medium（YT0004）重悬，30℃摇床震荡培养30-60 min。YPD Plus用于转化后复苏酵母菌，转化效率可以提高50-100%。

6.3,000 转离心3 min。加入100 μL无菌水重悬菌体。

7.将重悬菌体全部涂布于相应的缺陷型培养基平板上。

8.30℃恒温培养3-5天，直至平板长出菌落。

菌液转化步骤：

     搜集1.5-3 mL 酵母菌液沉淀后，加入100 μL 的P1溶液（转化液）和1 μg 质粒DNA后震荡混匀。后续步骤和平板菌落转化步骤4-8相同。

注意事项：

1.  转化全程要求无菌操作。

2.  为了保证转化效率，感受态不宜直接用液氮冻存。

3.  增加酵母质粒的纯度和浓度可以提高转化效率。