摘要:
美国佐治亚州健康科学大学GHSU细胞生物学和解剖学系的科学家们已经成功地在活的斑马鱼疾病模型上建立了高通量筛选体系。GHSU副教授Jeff Mumm博士使用帝肯Infinite® M1000 PRO多功能酶标仪,在活的斑马鱼模型上进行药物筛选的研究。
Infinite® M1000 PRO多功能酶标仪的Z轴聚焦功能以及卓越的信噪比(>500:1),使检测灵敏度提高了一个数量级,更重要的是能检测到相当微弱的信号。
Mumm博士说:“这一点非常重要,以β细胞的再生为例,幼体斑马鱼体内细胞数量相当少;虽然我们能研究成熟的斑马鱼,但是被筛选出来的成体斑马鱼的细胞数量远远少于幼体斑马鱼 ;因此对于幼体斑马鱼,我们需96孔板进行培养,但对于成体斑马鱼,我们却要用到6孔板。为了提高检测的稳定性,我们对两种不同荧光基团的比值进行测量——其中一种荧光基团与目标细胞种类相关,另一种荧光基团与环境中的对照细胞相关——我们得到了非常好的Z 值,Quad4 四光栅技术便是它的关键。”
“使用了Infinite® M1000 PRO多功能酶标仪后,我们能够定量检测斑马鱼疾病模型中目标细胞的损失与再生,以及疾病相关信号通路中小分子诱导的变化; 更重要的是,Infinite® M1000 PRO多功能酶标仪高信噪比使得我们能够监测个体斑马鱼长达数天内的变化。 我们已经通过鉴别自发荧光基团、鉴定报告基团的多样性以及开发适用于高通量筛选的多孔板模式对实验体系进行了优化。 ”
最后,Mumm博士总结道:“Infinite® M1000 PRO帮助我们开发了这个简单,快速,低成本的自动化定量系统,该系统可广泛应用于以活的斑马鱼为模型、以荧光或发光信号为报告的高通量化合物筛选或遗传筛选。”
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